哪些因素会影响液相色谱柱的试验结果
更新时间:2025-06-11 点击次数:141次
液相色谱柱是一种用于液体色谱分析仪器,有柱管、压帽/卡套、筛板(滤片)等组成。
影响因素:
A:物理因素
1、硅胶纯度--填料硅胶的纯度与残留金属离子浓度
2、色谱柱尺寸--填料床的长度和内径
3、颗粒形状--球型或不规则型
4、粒径--平均颗粒直径,通常3-10μm
5、表面积--颗粒外表面和内部孔表面的总和,以m2/gram表示
6、孔径--颗粒的孔或腔的平均尺寸,范围80-300Å
B:化学性质
1、键合类型--单体键合-键合相分子与基体单点相连
2、碳覆盖率--与基体物质相连的键合相的量
3、封端--键合步骤之后,用短链将裸露的硅羟基键合后封闭起来
色谱柱的维护与保存:
使用前活化:
新柱需用纯乙腈低流速(0.2mL/min)润洗,再逐步过渡至流动相。
日常防护:
加装保护柱防止污染;避免温度/压力突变。
含缓冲盐流动相:先用低比例有机相(如水:乙腈=9:1)冲洗1小时,再换纯有机相保存。
保存方法:
反相柱:乙腈或甲醇保存;正相柱:非极性溶剂(如正己烷)保存。
密封柱两端防止填料干涸。